尊龙凯时公司推出的小鼠肠道灌洗液抗体检测试剂盒背景简介:肠道屏障在维持肠道稳态中起着至关重要的作用,通过防止细菌的过度吸收来保护机体。免疫球蛋白,如分泌型IgA、IgG和IgM,参与了这一保护机制。Chondrex公司研发了一套标准的制备方案,可用于小鼠肠道灌洗液,同时提供能够检测总免疫球蛋白水平和抗原特异性抗体水平的ELISA试剂盒。抗原抗体水平的检测能够反映出肠道免疫功能的状态,例如,口服卵清蛋白(OVA)与霍乱毒素佐剂联合免疫后,肠道内的IgA抗体水平会显著增强。通过检测抗OVA IgA抗体水平并与总IgA水平进行比较,可以有效评估该免疫反应。
产品应用包括:
- 肠道免疫功能状态评估
- 过敏原特异性抗体检测
- 肠道相关特异性抗体检测
小鼠肠道灌洗液的制备流程(用于抗体分析)是基于Lycke等研究者发表的文献方法进行改进的,具体步骤如下:
- 取出小鼠的小肠组织,并用剪刀夹钳固定肠道的一端。
- 使用聚四氟乙烯(PTFE)导管注射器(避免刺穿肠道),向肠腔缓慢注入3ml的蛋白酶抑制剂溶液(含0.1mg/ml胰蛋白酶抑制剂、50mM EDTA、1mM PMSF的PBS缓冲液)。
- 夹闭肠道的另一端,在室温下孵育10分钟。
- 收集肠道内容物至试管,并进行剧烈涡旋震荡和超声破碎处理。
- 在54℃下以1800rpm离心10分钟。
- 取上清液转移至新管,按1ml的灌洗液添加10μl 5%磷酸氢二钠的比例混合。
- 在室温下孵育15分钟。
- 按1ml的灌洗液添加50μl的正常山羊血清的比例进行混合。
该混合液可依照1:1的比例与ELISA试剂盒配套样品稀释缓冲液稀释后,进行ELISA检测。
产品订购的检测指标包括:IgA、IgE、IgM、IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b等,各类细菌和毒素的相关抗体检测如大肠杆菌、脂多糖、肠毒素等。
如需获取关于针对特定抗原、细菌或毒素的抗体评估方案,请咨询尊龙凯时的中国区总代理——北京博蕾德生物科技有限公司。