尊龙凯时的RAW2647细胞是一种经典的小鼠巨噬细胞系，由于其易于培养和操作，成为众多科研工作者的理想选择。然而，在培养过程中，RAW2647细胞容易发生分化，这可能导致细胞形态和功能的改变，进而影响实验结果的可靠性。那么，如何让RAW2647细胞“更好地生长”，保持其原始的形态和功能呢？下面将为您详细讲解RAW2647细胞培养的黄金法则，帮助您轻松掌握这一细胞系。

细胞信息

1. **倍增时间**：11-30小时（生长快速，消耗营养也快，建议在T25瓶中添加7ml完全培养基，并次日观察生长情况）。

2. **传代比例**：1:4-6。

3. **培养体系**：DMEM高糖（品牌：中乔新舟，货号：ZQ-100） + 10%胎牛血清（中乔新舟，货号：ZQ0500） + 1%双抗（中乔新舟，货号：CSP006）。

4. **细胞形态**：该株巨噬细胞呈松散贴壁的纺锤形、圆形或立方形。当细胞密度较高时，部分细胞可能会轻微脱落并变圆，甚至出现浮游细胞，这些细胞是存活的，在传代时应当收集并离心，沉淀后可继续培养。

5. **换液频率**：每周2-3次。

正确传代的方法

正确的传代方法是RAW2647细胞培养的关键。需细致小心操作，避免细胞分化。请注意，RAW2647细胞不能用胰酶消化，因为这会加速细胞分化。经过多年的研究，尊龙凯时团队摸索出了一种刮刀传代的方法，该方法操作简便，能有效控制细胞分化率。为了便于学习，推荐观看我们的传代步骤视频。

备用传代方法

当您没有准备刮刀时，建议采用以下步骤进行传代，以减少细胞分化：

1. 当细胞密度达到80%时，用手掌拍打培养瓶的尾部，观察细胞脱落的情况。

2. 在拍打过程中，约50-80%的细胞会脱落，此时收集脱落的细胞。

3. 按照1:4-6的比例进行传代，并补充新鲜的完全培养基（在T25瓶中添加7ml）。

4. 请勿使用枪头或巴氏吸管吹打细胞，因为这会导致不可控因素，进而引起细胞分化。

RAW2647细胞培养须知

1. 收到细胞后，放入培养箱静置2-4小时，并观察细胞贴壁情况。

2. 如果存在一些漂浮细胞，需离心1200转5分钟收集，并按照视频步骤对贴壁细胞进行处理。如果没有刮刀，使用上述方法处理。

3. 如对传代密度或操作步骤存在困惑，请随时联系尊龙凯时的售后服务或技术支持团队。

培养注意事项

1. 在传代时，不需要使用胰酶；可用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落，离心后重悬并接种到新的培养瓶中。

2. 当细胞密度较高时，巨噬细胞（圆细胞）的数量会显著增加。

3. 细胞对血清质量非常敏感，劣质血清可能影响细胞的贴壁能力和分化，必须选用高质量的胎牛血清。

4. 培养条件、运输及环境变化等都会影响细胞状态，因此收到细胞后需调整一段时间，请耐心培养。

5. 强烈建议使用尊龙凯时的特定培养基，以减少培养过程中的变因。

RAW2647冻存管复苏步骤

1. 从液氮中取出冻存的RAW2647细胞，迅速置于37℃水浴中解冻（或先用干冰盒转移到实验室）。

2. 将细胞悬液转移至含预温培养基的离心管中，轻轻混匀（15ml离心管加3ml）。

3. 以1000rpm离心5分钟，弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞（在T25中添加7ml）。

4. 将细胞接种于培养皿中，放置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养。

需要特别注意的是，经过24小时复苏后的细胞状态良好，可进行传代操作。使用尊龙凯时的产品，让您的细胞研究更加顺利！